SARS-Cov-2 አር ኤን ኤ በሰሜን ጣሊያን በበርጋሞ የተወሰነ ጉዳይ ላይ ተገኝቷል፡ የመጀመሪያ ቀዳሚ ማስረጃ

በ SARS-CoV-2 ቫይረስ ምክንያት የኮቪድ-19 በሽታ በመባል የሚታወቀው ከባድ አጣዳፊ የመተንፈሻ አካላት በሽታ - በመተንፈሻ ጠብታዎች እና በቅርብ ግንኙነቶች እንደሚተላለፍ ይታወቃል።[1]የ COVID-19 ሸክም በሎምባርዲ እና በፖ ቫሊ (ሰሜን ጣሊያን)፣[2] ከፍተኛ የቅንጣት ይዘት ያለው፣ በሰው ጤና ላይ አሉታዊ ተጽእኖ እንደሚያሳድር በሚታወቅ አካባቢ በጣም ከባድ ነበር።[3]በኤፕሪል 12 ቀን ለጣሊያን የሚገኙ የክልል አኃዞች እንደሚያሳዩት በአሁኑ ጊዜ አዎንታዊ ከሆኑ ሰዎች መካከል 30% ያህሉ አሁንም በሎምባርዲ ውስጥ ይኖራሉ (ከወረርሽኙ መጀመሪያ ጀምሮ የተረጋገጠውን አጠቃላይ ጉዳዮች ከግምት ውስጥ ካስገባ 40% ያህሉ) ፣ በመቀጠል ኤሚሊያ ሮማኛ (13.5%) ፣ ፒዬድሞንት (10.5%) እና ቬኔቶ (10%)።[2]እነዚህ አራት የፖ ቫሊ ክልሎች በጣሊያን ውስጥ ከተመዘገቡት አጠቃላይ ሞት 80% እና 65% የከፍተኛ እንክብካቤ ክፍል ምዝገባዎችን ይይዛሉ።[2]

በሃርቫርድ የህዝብ ጤና ትምህርት ቤት የተደረገ ጥናት በአሜሪካ ውስጥ በ COVID-19 ምክንያት በ PM ትኩረት እና የሟችነት መጠን መጨመር መካከል ያለውን ግንኙነት የሚያረጋግጥ ይመስላል[4] ከዚህ ቀደም በተደረጉት ግንኙነቶች SARS-CoV-2 ሊሆን እንደሚችል ገምተናል። ኢንፌክሽኑ በሚሰራጭበት ጊዜ ቫይረሱ በደቂ ቁስ (PM) ላይ ሊኖር ይችላል ፣
ለሌሎች ቫይረሶች ይገኛል ። በPM ላይ SARS-CoV-2 መኖሩን በማረጋገጥ ወይም በማግለል ላይ።
እዚህ ከየካቲት 21 እስከ መጋቢት ባሉት ተከታታይ 3 ሳምንታት ውስጥ በሁለት የተለያዩ የአየር ናሙናዎች የተሰበሰበውን ከቤት ውጭ/አየር ወለድ PM10 ከኢንዱስትሪ ቦታ ከበርጋሞ ጠቅላይ ግዛት በ34 PM10 ናሙናዎች ላይ ያደረግነውን የትንታኔ የመጀመሪያ ውጤት እናቀርባለን። 13ኛ.
በፓን እና ሌሎች የተገለጸውን ዘዴ በመከተል.እ.ኤ.አ. በ 2019 (ለአየር ወለድ ቫይረሶች ስብስብ ፣ ቅንጣት መጠን እና መለየት) [17] PM ናሙናዎች በኳርትዝ ​​ፋይበር ማጣሪያዎች ላይ የተሰበሰቡት ዝቅተኛ መጠን ያለው ግራቪሜትሪክ የአየር ናሙና (38.3 ሊት / ደቂቃ ለ 23 ሰአታት) በመጠቀም ነው ፣ ይህም በማጣቀሻ ዘዴ EN12341 መሠረት። 2014 ለ PM10 ክትትል.የተወሰነ ቁስ በ99.9% የተለመደ በማጣሪያዎች ላይ ተይዟል።ኤሮሶል ማቆየት፣ በአግባቡ ተከማችቶ ወደ ትራይስቴ ዩኒቨርሲቲ አፕላይድ እና ንፅፅር ጂኖሚክስ ላብራቶሪ ደረሰ።የናሙናውን “አካባቢያዊ” ባህሪ ግምት ውስጥ በማስገባት በዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴስ አጋቾች የበለፀገ ከሆነ፣ ለማጣሪያዎቹ አይነት ተስማሚ የሆነውን ፈጣን አር ኤን ኤ ሰገራ የአፈር ማይክሮቦች ኪት በመጠቀም አር ኤን መውጣቱን ቀጠልን።[18]ግማሽ ማጣሪያ ተንከባሎ፣ ከላይ በኩል ወደ ውስጥ ትይዩ፣በ 5 ሚሊ ሜትር የ polypropylene ቱቦ ውስጥ, በመሳሪያው ውስጥ ከሚቀርቡት ዶቃዎች ጋር.ከመጀመሪያው 1 ሚሊር ሊሊሴቡፈር ወደ 400 ul መፍትሄ ማግኘት ችለናል, ከዚያም በመደበኛ ፕሮቶኮሎች በተገለፀው መሰረት ተዘጋጅቷል, ይህም የ 15 ul የመጨረሻ ደረጃን ያመጣል.በመቀጠል 5 ul ለ SARS-CoV-2 ምርመራ ጥቅም ላይ ውሏል።የናሙናውን ልዩ አመጣጥ ስንመለከት፣ qScript XLT ባለ1-ደረጃ RT-qPCR ToughMix ጥቅም ላይ ውሏል።[19]የማጉላት ስርአቶቹ በኮርማን እና ሌሎች በWHO ድረ-ገጽ ላይ የታተመው ፕሮቶኮል ናቸው [20]።
ፈተናው የ SARS-CoV-2 አር ኤን ኤ በንጥል ቁስ ላይ መኖሩን ለማረጋገጥ ወይም ለማግለል በግልፅ ያለመ ነበር።የመጀመሪያው ትንታኔ "ኢ ጂን" እንደ ሞለኪውላር ማርከር ተጠቅሞ በ 15 ከ 16 ማጣሪያዎች ላይ አስደናቂ አዎንታዊ ውጤት አስገኝቷል, ምንም እንኳን እንደምንጠብቀው, ሲቲ በ 36-38 ዑደቶች መካከል ነበር.
ከዚያ በኋላ ትንታኔውን በ 6 አዎንታዊ ማጣሪያዎች ላይ ደጋግመናል (ቀድሞውንም ለ “ኢ ጂን” አዎንታዊ ነው) የ “RtDR ጂን” እንደ ሞለኪውላር ማርከር - ለ SARS-CoV-2 በጣም የተለየ - 5 ጉልህ ውጤቶች ደርሷል። የአዎንታዊነት;የውሸት አዎንታዊነትን ለማስወገድ የቁጥጥር ሙከራዎችም በተሳካ ሁኔታ ተካሂደዋል (ምስል 1).
አሁን ያለው የናሙና ቁሳቁስ እንዳያልቅ፣ የተቀሩት የተወሰዱ አር ኤን ኤዎች ለሁለተኛ ጊዜ ለማከናወን በአካባቢው ዩኒቨርሲቲ ሆስፒታል (በጣሊያን መንግሥት ለ SARS-CoV-2 ምርመራ ምርመራ ከተፈቀደላቸው ክሊኒካዊ ማዕከላት አንዱ) ተደርገዋል። ትይዩ ዓይነ ስውር ሙከራ.ይህ ሁለተኛው ክሊኒካል ላቦራቶሪ ለ 34 አር ኤን ኤ ኤ ፣ኤን እና RdRP ጂኖች ሞክሯል ፣ ቢያንስ ለሦስቱ ማርከር ጂኖች 7 አወንታዊ ውጤቶችን ሪፖርት አድርጓል ፣ ለሦስቱም ጠቋሚዎች አወንታዊነት ተለይቷል (ምስል 2)።በናሙናው ባህሪ ምክንያት እና ናሙናው የተካሄደው ለክሊኒካዊ ምርመራ ሳይሆን ለአካባቢ ብክለት ሙከራዎች መሆኑን ከግምት ውስጥ በማስገባት (እንዲሁም ማጣሪያዎች ቢያንስ ለአራት ሳምንታት ተከማችተው ሞለኪውላዊ የጄኔቲክ ትንታኔዎችን ከማድረጋቸው በፊት ግምት ውስጥ በማስገባት)በጣሊያን መዘጋት ምክንያት) በ 8 ማጣሪያዎች ላይ በጣም ልዩ የሆነ "RtDR ጂን" በመለየት የ SARS-CoV-2 ቫይረስ አር ኤን ኤ መኖሩን በትክክል ማሳየታችንን ማረጋገጥ እንችላለን።ነገር ግን፣ ከማጣሪያዎቹ ተጨማሪ ቁሳቁሶች ባለመኖሩ፣ ለ 3 ሞለኪውላር ማርከሮች ሁሉ አዎንታዊነት ለማሳየት በቂ የሆኑ ሙከራዎችን በአንድ ጊዜ መድገም አልቻልንም።
ይህ SARS-CoV-2 አር ኤን ኤ ከቤት ውጭ በሚገኙ ጥቃቅን ነገሮች ላይ ሊኖር እንደሚችል የመጀመሪያው ቅድመ ማስረጃ ነው ፣ ስለሆነም በከባቢ አየር መረጋጋት እና ከፍተኛ የPM ከፍተኛ ክምችት ፣ SARS-CoV-2 ከቤት ውጭ PM እና - በ የእነሱ ስርጭት ቅንጅት መቀነስ - በከባቢ አየር ውስጥ የቫይረሱን ዘላቂነት ያሳድጋል.የዚህ የመጀመሪያ ደረጃ ተጨማሪ ማረጋገጫዎችማስረጃዎች በመካሄድ ላይ ናቸው እና ስለ SARS-CoV-2 ጠቃሚነት እና ጥቃቅን በሆኑ ነገሮች ላይ በሚታተሙበት ጊዜ የቫይረቴሽንነት ሁኔታን በተመለከተ የእውነተኛ ጊዜ ግምገማን ማካተት አለበት።በአሁኑ ጊዜ ቫይረሱ በPM እና በኮቪድ-19 ወረርሽኙ ሂደት መካከል ያለውን ግንኙነት በተመለከተ ምንም ዓይነት ግምት መስጠት አይቻልም።ሌሎች በተለይ ትኩረት ሊሰጣቸው የሚገቡ ጉዳዮች የጠቅላይ ሚኒስትሩ አማካኝ መጠን በመጨረሻ ነው።ለበሽታው “የማሳደግ ውጤት” ያስፈልጋል (PM ለቫይራል ጠብታ ኒውክሊየስ “ተጓጓዥ” ሆኖ ሊያገለግል እንደሚችል ከተረጋገጠ) አልፎ ተርፎም የክትባት እድሉ በዝቅተኛ የ PM ጣራዎች ላይ አነስተኛ መጠን ያለው ተጋላጭነት ምክንያት .

Fig.1 የ E (A) እና RdRP ጂኖች (B) የማጉላት ኩርባዎች፡ አረንጓዴ መስመሮች የተሞከሩ ማጣሪያዎችን ይወክላሉ;መስመሮችን ያቋርጡየማጣቀሻ ማጣሪያ ማጣሪያዎችን ይወክላል;ቀይ መስመሮች የአዎንታዊ ናሙናዎችን ማጉላት ይወክላሉ.
ምስል.1

ምስል.2.ለሁሉም የ 34 PM10 ናሙናዎች ለ E፣ N እና RdRP ጂኖች አዎንታዊ ውጤቶች (በX ምልክት የተደረገባቸው)በሁለተኛው ትይዩ ትንታኔዎች ውስጥ የተፈተኑ ማጣሪያዎች።
ምስል.2ሊዮናርዶ ሴቲ 1 ፣ ፋብሪዚዮ ፓሳሪኒ2 ፣ ጂያንሉጂ ዴ ጌናሮ3 ፣ ፒየርሉጂ ባርቢዬሪ4 ፣ ማሪያ ግራዚያ ፔሮኔ5 ፣ ማሲሞ ቦሬሊ6 ፣ ጆላንዳ ፓልማሳኒ3 ፣ አሌሲያ ዲ ጊሊዮ3 ፣ ቫለንቲና ቶርቦሊ6 ፣ አልቤርቶ ፓላቪሲኒ6 ፣ ማውሪዚዮ ሩሲሲዮ7 ፣ ፕሪስሲኖ
1. የኢንዱስትሪ ኬሚስትሪ, የቦሎኛ ዩኒቨርሲቲ, Viale del Risorgimento - 4, I-40136, ቦሎኛ, ጣሊያን
e-mail: leonardo.setti@unibo.it
2. የኢንተር ዲፓርትመንት ማዕከል ለኢንዱስትሪ ምርምር "ታዳሽ ምንጮች, አካባቢ, ሰማያዊ እድገት, ኢነርጂ",
University of Bologna, Rimini, Italy e-mail: fabrizio.passarini@unibo.it
3. የባዮሎጂ ዲፕት, ዩኒቨርሲቲ "አልዶ ሞሮ" የባሪ, ባሪ, ጣሊያን
e-mail: gianluigi.degennaro@uniba.it; alessia.digilio@uniba.it; jolanda.palmisani@uniba.it
4. የኬሚካል እና ፋርማሲዩቲካል ሳይንሶች ዲፓርትመንት፣ የትሪስቴ ዩኒቨርሲቲ፣ ትራይስቴ፣ ጣሊያን
e-mail: barbierp@units.it
5. የአካባቢ ምርምር ክፍል, TCR TECORA, ሚላን, ጣሊያን
e-mail: mariagrazia.perrone@tcrtecora.com
6. የህይወት ሳይንስ ዲፓርትመንት - የትሪስቴ ዩኒቨርሲቲ, ትራይስቴ, ጣሊያን
e-mail: borelli@units.it; torboli@units.it; pallavic@units.it
7. የላብራቶሪ ሕክምና ክፍል, ዩኒቨርሲቲ ሆስፒታል ጁሊያኖ ኢሶንቲና (ASU GI), ትራይስቴ, ጣሊያን
email: maurizio.ruscio@asugi.sanita.fvg.it
8. የጣሊያን የአካባቢ ህክምና ማህበር (ሲኤምኤ), ሚላን, ጣሊያን
e-mail: priscofreedom@hotmail.com; alessandro.miani@unimi.it
9. የአካባቢ ሳይንስ እና Poicy ክፍል, ሚላን ዩኒቨርሲቲ, ሚላን, ጣሊያን
e-mail: priscofreedom@hotmail.com; alessandro.miani@unimi.it
ተጓዳኝ ደራሲ:
ሊዮናርዶ ሴቲ, Department of Industrial Chemistry, University of Bologna Viale del Risorgimento 4, 40136, Bologna, Italy; e-mail: leonardo.setti@unibo.it

ዋቢዎች
1. የዓለም ጤና ድርጅት፣ ኮቪድ-19ን የሚያስከትል የቫይረስ ስርጭት ዘዴዎች፡ ለአይፒሲ የጥንቃቄ ምክሮች አንድምታ፣ ሳይንሳዊ አጭር መግለጫ;የሚገኘው በ https://www.who.int/newsroom/commentaries/detail/modes-of-transmission-of-virus-causing-covid-19-implications-for-ipcprecaution-recommendations (29 ማርች 2020)
2. የጣሊያን ጤና ጥበቃ ሚኒስቴር፣ በጣሊያን ውስጥ የየዕለት ማስታወቂያ የኮቪድ-19 ወረርሽኝ፣ በ http://www.salute.gov.it/imgs/C_17_notizie_4451_0_file.pdf ይገኛል።
3. EEA, የአውሮፓ የአካባቢ ጥበቃ ኤጀንሲ, በአውሮፓ ውስጥ የአየር ጥራት 2019 ሪፖርት;ቁጥር 10/2019;የአውሮፓ የአካባቢ ጥበቃ ኤጀንሲ፡ ኮፐንሃገን፣ ዴንማርክ፣ ይገኛል በ https://www.eea.europa.eu/publications/airquality-in-europe-2019
4. Xiao Wu፣ Rachel C. Nethery፣ M. Benjamin Sabath፣ Danielle Braun፣ Francesca Dominici፣ ለአየር ብክለት መጋለጥ እና ለኮቪድ-19 ሞት በዩናይትድ ስቴትስ፣ በ https://projects.iq.harvard.edu/ ይገኛል። ፋይሎች/ኮቪድ-pm/ፋይሎች/pm_and_covid_mortality.pdf
5. የጣሊያን የአካባቢ ህክምና ማህበር (ሲኤምኤ)፣ የአቀማመጥ ወረቀት ከፊል ጉዳይ እና ኮቪድ-19፣
ይገኛል፡ http://www.simaonlus.it/wpsima/wp-content/uploads/2020/03/COVID_19_positionpaper_ENG.pdf
6. Setti L., Passarini F., De Gennaro G., Barbieri P., Perrone MG, Piazzalunga A., Borelli M., Palmisani J., Di Gilio A, Piscitelli P, Miani A., አሳማኝ ሚና አለ? በሰሜን ኢጣሊያ ኮቪድ-19 መስፋፋትን በተመለከተ ለከፊል ጉዳይ?፣ BMJ ፈጣን ምላሾች፣ ኤፕሪል 8፣ 2020፣ በ https://www.bmj.com/content/368/bmj.m1103/rapid-responses ይገኛል።
7. Sedlmaier, N., Hoppenheidt, K., Krist, H., Lehmann, S., Lang, H., Buttner, M. ትውልድ የአቪያን ኢንፍሉዌንዛ ቫይረስ (AIV) የተበከለ የሰገራ ጥቃቅን ጥቃቅን ቁስ አካላት (PM2.5): ጂኖም እና ኢንፌክሽኑን መለየት እና የማስመጣት ስሌት።የእንስሳት ህክምና ማይክሮባዮሎጂ.139, 156-164 (2009)
8. Zhao, Y., Richardson, B., Takle, E., Chai, L., Schmitt, D., Win, H. የአየር ወለድ ስርጭት እ.ኤ.አ. በ2015 በከፍተኛ ደረጃ በሽታ አምጪ የአቪያን ኢንፍሉዌንዛ ወረርሽኝ ስርጭት ላይ ሚና ተጫውቶ ሊሆን ይችላል። ዩናይትድ ስቴት.Sci Rep. 9, 11755. https://doi.org/10.1038/s41598-019-47788-z (2019)
9. ማ, ዋይ., ዡ, ጄ., ያንግ, ኤስ, ዣኦ, ዋይ, ዠንግ, ኤክስ. በምእራብ ቻይና በኩፍኝ መከሰት ላይ የአቧራ ክስተቶች ተጽእኖ ግምገማ.የከባቢ አየር አካባቢ.157, 1-9 (2017)
10. Sorensen, JH, Mackay, DKJ, Jensen, C. Ø., Donaldson, AI የእግር እና የአፍ በሽታ ቫይረስ ኤፒዲሚዮል የከባቢ አየር ስርጭትን ለመተንበይ የተቀናጀ ሞዴል.ተበክሏል።፣ 124፣ 577–590 (2000)
11. Glostera, J., Alexandersen, S. አዲስ አቅጣጫዎች፡ በአየር ወለድ የእግር እና የአፍ በሽታ ቫይረስ የከባቢ አየር አካባቢ, 38 (3), 503-505 (2004)
12. Reche, I., D'Orta, G., Mladenov, N., Winget, DM, Suttle, CA የቫይረሶች እና የባክቴሪያ ክምችት መጠን ከከባቢ አየር ወሰን በላይ.የ ISME ጆርናል.12, 1154-1162 (2018)
13. ኪን፣ ኤን፣ ሊያንግ፣ ፒ.፣ ዉ፣ ሲ፣ ዋንግ፣ ጂ.፣ ሹ፣ ጥ.፣ ዢንግ፣ ኤክስ.፣ ዋንግ፣ ቲ.፣ ዞልፎ፣ ኤም.፣ ሴጋታ፣ ኤን. ., Knight, R., Gilbert, JA, Zhu, TF በሜጋሲቲ ውስጥ ከሚገኙ ጥቃቅን ቁስ አካላት ጋር ተያያዥነት ያለው የማይክሮባዮሎጂ የረጅም ጊዜ ዳሰሳ።ጂኖም ባዮሎጂ.21, 55 (2020)
14. Zhao, Y., Richardson, B., Takle, E., Chai, L., Schmitt, D., Win, H. የአየር ወለድ ስርጭት ሊኖር ይችላል.
እ.ኤ.አ. በ 2015 በዩናይትድ ስቴትስ ውስጥ በጣም በሽታ አምጪ የአቪያን ኢንፍሉዌንዛ ወረርሽኝ ስርጭት ውስጥ ሚና ተጫውቷል ።ሳይ
ተወካይ 9፣ 11755 https://doi.org/10.1038/s41598-019-47788-z (2019)
15.ማ, Y., Zhou, J., Yang, S., Zhao, Y., Zheng, X. በምእራብ ቻይና በኩፍኝ ክስተቶች ላይ የአቧራ ክስተቶች ተጽእኖ ግምገማ.የከባቢ አየር አካባቢ.157, 1-9 (2017)
16. ጂያንግ፣ ደብሊው፣ ላይንግ፣ ፒ.፣ ዋንግ፣ ቢ.፣ ፋንግ፣ ጄ.፣ ላንግ፣ ጄ.፣ ቲያን፣ ጂ.፣ ጂያንግ፣ ጄ.፣ ዙ፣ TF የተመቻቸ የዲኤንኤ ማውጣት እና የአየር ወለድ ተህዋሲያን ማይክሮቢያል ማህበረሰቦችን ሜታጂኖሚክ ቅደም ተከተል .ናት.ፕሮቶክ10, 768-779 (2015)
17. Pan, M., Lednicky, JA, Wu, C.-Y., ስብስብ, ቅንጣት መጠን እና የአየር ወለድ ቫይረሶችን መለየት.ጆርናል ኦፍ አፕላይድ ማይክሮባዮሎጂ፣ 127፣ 1596-1611 (2019)
18. Zymoresearch Ldt፣ የምርት መግለጫ፣ የሚገኘው በ https://www.zymoresearch.com/products/quick-rnafecal-soil-microbe microprep-kit
19. Quantabio Ltd፣ የምርት መግለጫ፣ በ https://www.quantabio.com/qscript-xlt-1-steprt-qpcr-toughmix ይገኛል።
20. ኮርማን፣ VM፣ Landt፣ O.፣ Kaiser፣ M.፣ Molenkamp፣ R.፣ Meijer፣ A.፣ Chu፣ DK፣ እና Mulders፣ DG (2020)።
የ2019 ልብ ወለድ ኮሮናቫይረስ (2019-nCoV) በእውነተኛ ጊዜ በRT-PCR መለየት።Eurosurveillance፣ 25(3)፣ በ ላይ ይገኛል፡.https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6988269/

ዋናው፡ https://doi.org/10.1101/2020.04.15.20065995


የልጥፍ ሰዓት፡ ኤፕሪል 18-2020